しろありNo.176
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4646Enterobacter cloacaeが, 主な水素生成細菌であることを示している。 本研究では, 後腸破砕物を添加した培養液からシングルコロニーとして分離した細菌の中で, 好気性雰囲気24時間培養では水素を産生しないが嫌気性雰囲気24時間培養で水素を産生した嫌気性細菌の同定を試みた。ヤマトシロアリ後腸破砕物から分離した嫌気性雰囲気でのみ水素を産生する細菌の16S rRNA遺伝子のV3-V4領域の配列を解析した結果, 相同性100%(359/359, score 712 bits, e-value 0.0)の2菌種Enterobacter asburiae, Enterobacter tabaciが第1候補としてあがり, 相同性100%(358/358, score 710 bits, e-value 0.0)の10菌種Enterobacter bugandensis, Enterobacter cloacae, Enterobacter hormaechei, Enterobacter ludwigii, Enterobacter mori, Enterobacter roggenkampii, Enterobacter xiangfangensis, Leclercia adecarboxylata, Lelliottia nimipressuralis, Pantoea agglomeransがそれに続いた。増幅されたDNAの長さが, 16S rRNA遺伝子のV3-V4領域DNAの長さ428bpの内359bpと短いため, 現在428bp全長の再解析進めており, 菌種を再検討している。また, ヤマトシロアリ後腸内に共生する水素生成細菌に地域性があるかどうか検討するため, 奈良県, 宮崎県, 鹿児島県で採集したヤマトシロアリ職蟻から分離した水素生成細菌の同定を進めているところである。 2)Williams,C.M.,P.C.Veivers,M.Slaytor,S.V.Cleland(1994):AtmosphericcarbondioxideandacetogenesisinthetermiteNasutitermes walkeri (Hill).Comp.Biochem.Physiol.PartA:Physiol.,107,113-118.3)Odelson,D.A.,J.A.Breznak(1983):Volatilefattyacidproductionbythehindgutmicrobiotaofxylophagoustermites.Appl.Environ.Microbiol.,45,1602-1613.4)Eggleton,P.,N.Lo,D.E.Bignell,L.Nunes(1997):Ontherespiratoryquotient(RQ)oftermites(Insecta:Isoptera).J.InsectPhysiol.,43,749-758.5)Itakura,S.,H.Tanaka,A.Enoki(1998):Distributionofcellulases,glucoseandrelatedsubstancesinthebodyofCoptotermes formosanus.Mat.Org.,31,17-29.6)Watanabe,H.,G.Tokuda(2001):Animalcellulases.Cell.Mol.LifeSci.,58,1167-1178.7)Nakashima,K.,H.Watanabe,H.Saitoh,G.Tokuda,J.-I.Azuma(2002):Dualcellulose-digestingsystemofthewood-feedingtermite,Coptotermes formosanusShiraki.InsectBiochem.Mol.Biol.,32,777-784.8)Yamin,M.A.(1978):AxeniccultivationofthecellulolyticflagellateTrichomitopsis termopsidis (Cleveland)fromtheTermite Zootermopsis.J.Protozool.,25,535-538.9)Ohkuma,M.,S.Noda,S.Hattori,T.Iida,M.Yuki,D.Starns,J.-I.Inoue,A.C.Darby,Y.Hongoh(2015):AcetogenesisfromH2plusCO2andnitrogenfixationbyanendosymbioticspirocheteofatermite-gutcellulolyticprotist.Proc.Natl.Acad.Sci.USA,112,e10224-e10230.10)Slaytor,M.,P.C.Veivers,N.Lo(1997):AerobicandanaerobicmetabolisminthehighertermiteNasutitermes walkeri(Hill).InsectBiochem.Mol.Biol.,27,291-303.11)Hongoh,Y.,V.K.Sharma,T.Prakash,S.Noda,H.Toh,T.D.Taylor,T.Kudo,Y.Sakaki,A.Toyoda,M.Hattori,M.Ohkuma(2008):GenomeofanendosymbiontcouplingN2fixationtocellulolysiswithinprotistcellsintermitegut.Science,322,1108-1109.12)Brune,A.(2014):Symbioticdigestionoflignocelluloseintermiteguts.NatureRev.Microbiol.,12,168-180.謝辞 ヤマトシロアリ腸内微生物の培養と産生ガスの定量を実施された小西智之氏と山本大智氏(令和元年度森林生物化学研究室卒業研究生),水素生成細菌の同定を行われた田仲輝希氏と山田泰生氏(令和2年度森林生物化学研究室卒業研究生)ならびに野海剛志氏と大北明夫氏(令和3年度森林生物化学研究室卒業研究生)に深く御礼申し上げる。参考文献1)Ebert,A.,A.Brune(1997):Hydrogenconcentrationprofilesattheoxic-anoxicinterface:amicrosensorstudyofthehindgutofthewood-feedinglowertermiteReticulitermes flavipes(Kollar).Appl.Environ.Microbiol.,63,4039-4046.

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